SDS-PAGE蛋白电泳出现了问题，越往下条带越宽是什么回事？
最近一直在做SDS-PAGE，由于我的样品蛋白组成很复杂，并且很多蛋白都是在15KD以下的，所以我用的是15%的分离胶，和5%的浓缩胶（Sample Text），但是跑出来的条带奇奇怪怪的。如下图，希望懂的大神帮我分析分析啊！！
问题如下：
1、为什么5号和7号条带泳道很宽啊，比1和2号的Marker要宽了近1倍啊？ 并且几乎有越往下越变宽的趋势。。什么 原因啊？？
2、蛋白Marker 14KD以下的那些黑黑的是什么东西啊？？ 跑了好多次数，都是下面是全黑的，难道是我的蛋白样品弥散了？？？但是也不至于底部全是黑的啊。或者是我配胶没有配好？？
3、还有就是，由于我希望14KD以下的条带更清楚一点，有什么好的合适的方法呢？ 用17%的分离胶，或者在分离胶，浓缩胶里面加8M尿素可以吗？？
希望知道的虫友能够给我解答一下！！！
15%分离胶 过夜脱色.jpg
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勿沉啊 大牛们给我回复一下啊！
上样量有点大了
嗯，上样量确实有点大了。后来做把上样量减少了，宽度就减小了。
那电泳图片下面那些一大团黑黑的是什么啊？每次跑基本上下面都有黑的东西。。。怎么回事�
，
要看15kd以下，换Tricine系统电泳。
用的是经典6.8和8.8系统吗？黑的一片是指示前沿结合了更多的染料，电泳时间延长让前沿跑出就没有这一片了，但你的小蛋白可能就会跑丢
我也出现过这种情况 上样量每个泳道都是一样的 不知道为什么
有些条带变得很宽