动物组织RNA抽提
前段时间做了高通量测序,因为送测序的缘故动物组织样品是保存Trizol中,目前要做验证,抽提RNA遇到了问题。
我是直接在Trizol保存的组织中加钢珠低温研磨,然后按照正常Trizol法抽提,最后RNA量挺高,但是电泳检测发现RNA都降解成碎片,分不出28s,18s,5s
RNA,而按照同样方法抽提的细胞RNA(不用研磨)。求问可能是什么缘故,保存在Trizol中的组织该如何抽提RNA???求助 返回小木虫查看更多
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前段时间做了高通量测序,因为送测序的缘故动物组织样品是保存Trizol中,目前要做验证,抽提RNA遇到了问题。
我是直接在Trizol保存的组织中加钢珠低温研磨,然后按照正常Trizol法抽提,最后RNA量挺高,但是电泳检测发现RNA都降解成碎片,分不出28s,18s,5s
RNA,而按照同样方法抽提的细胞RNA(不用研磨)。求问可能是什么缘故,保存在Trizol中的组织该如何抽提RNA???求助 返回小木虫查看更多
感觉你在抽提之前RNA就已经降解了。
由于你冻的是团块,可能trizol根本渗透不到团块内部,没有对RNA起保护作用。
建议新鲜组织研磨好后再加trizol裂解冻存。
当然直接抽提最好,
一般是保存的样品在液氮环境下研磨组织样品,然后加tirzol在冰上抽提
还有要用作测序的样品一般用好的试剂盒提