第一次做SYBRgreen1试验,不会分析啊
第一次做SYBRgreen1,引物是别人的,但是我想看看试用装的MIX好不好用就做了下,程序是95度10min,(94,15s;58,30s;7230s)40循环,退火采集信号;升到95度以0.2度每秒从58度升到95度。那个MIX里面有ROX,然后空白3个重复污染了,样品3个重复。跑出来的图如下。
我不太会分析,望大神指点建议。
扩增曲线.jpg
溶解曲线.jpg
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需要帮忙的详细点,看第一个图挺正常,怎么第三个变形了
这不是定量pcr嘛,导出数据看CT值
第三个不是溶解曲线。。是实时真正的信号,它减去背景值才会变成1图,1图是对数图,还可以选线形图
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这个样子,看图1 其实试剂是没问题的,做定量,得有内参和你要看的基因,然根据CT值算出你的基因相对表达量
我还没有做到那一步呢……谢谢啊