老师,您好,SEM 观察厌氧污泥颗粒上的微生物的怎么处理样品污泥颗粒样品? 返回小木虫查看更多
可以先用2.5%的戊二醛固定,然后用梯度乙醇脱水,真空干燥或晾干后就可以了
网上应该有吧! 颗粒污泥扫描电镜观察的样品预处理方法 (1)取样与清洗:在所需要的不同的反应阶段,从反应器中取出数颗好氧颗粒污泥,放入5mL的离心管中,用去离子水清洗数次,弃去上清液。 (2)固定:把清洗好的颗粒污泥加入2.5%,pH为6.8的戊二醛溶液并淹没样品,并置于4℃冰箱中固定2-12小时。 (3)冲洗:固定好的好氧颗粒污泥,用0.1mol/L,pH值为6.8的磷酸缓冲溶液冲洗3 次,每次10min。 (4)脱水:采用梯度乙醇脱水,将冲洗好的样品依次置于系列浓度50%、70%、80%、90%的乙醇进行脱水,每次10-15min,再用100%的乙醇脱水3 次,每次10-15min。 (5)置换:用乙醇/乙酸异戊酯为1:1的溶液,纯乙酸异戊酯各置换一次,每次15min。 (6)干燥:将置换后的样品小心取出,放入滤纸叠成的小盒中,置入干燥器中干燥8小时。 (7)粘样与喷金:将干燥好的颗粒污泥样品,用镊子小心取出干燥好的样品,用导电胶把颗粒样品粘附在铝制托盘上,之后用离子溅射镀膜仪(IB-5(Giko)型)在样品表面镀上一层1500nm 厚度的金属膜。 (8)观测:将处理好的待测样品置于扫描电镜(HITACHIS-4700型)下观察,
可以先用2.5%的戊二醛固定,然后用梯度乙醇脱水,真空干燥或晾干后就可以了
网上应该有吧!
颗粒污泥扫描电镜观察的样品预处理方法
(1)取样与清洗:在所需要的不同的反应阶段,从反应器中取出数颗好氧颗粒污泥,放入5mL的离心管中,用去离子水清洗数次,弃去上清液。
(2)固定:把清洗好的颗粒污泥加入2.5%,pH为6.8的戊二醛溶液并淹没样品,并置于4℃冰箱中固定2-12小时。
(3)冲洗:固定好的好氧颗粒污泥,用0.1mol/L,pH值为6.8的磷酸缓冲溶液冲洗3 次,每次10min。
(4)脱水:采用梯度乙醇脱水,将冲洗好的样品依次置于系列浓度50%、70%、80%、90%的乙醇进行脱水,每次10-15min,再用100%的乙醇脱水3 次,每次10-15min。
(5)置换:用乙醇/乙酸异戊酯为1:1的溶液,纯乙酸异戊酯各置换一次,每次15min。
(6)干燥:将置换后的样品小心取出,放入滤纸叠成的小盒中,置入干燥器中干燥8小时。
(7)粘样与喷金:将干燥好的颗粒污泥样品,用镊子小心取出干燥好的样品,用导电胶把颗粒样品粘附在铝制托盘上,之后用离子溅射镀膜仪(IB-5(Giko)型)在样品表面镀上一层1500nm 厚度的金属膜。
(8)观测:将处理好的待测样品置于扫描电镜(HITACHIS-4700型)下观察,
您好请问这样制得的样品在测SEM之前可以保存多久?还有就是25%的戊二醛怎么稀释到2.5%呢?