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你的这个帖子内容乱的不行。。。 一般RNA质量检测之后没问题的话,我们反转录完测一下浓度,然后稀释到200ng/ul左右。取1ul作为模板,用内参基因的引物进行PCR 看条带是否正确 明亮
额,是挺乱的,可能也跟我在这块的理论知识薄弱有关,这块的基础理论背景资料哪里会有?想补一点是一点
cDNA好坏,你要什么程度的好坏?简单的RT-PCR,接着做个PCR就完事了。 我不认同在RT之后可以通过OD对cDNA定量,这如何进行?cDNA要纯化么?体系里有RNA(即便被RNaseH降解),有NTP,这些都是强烈吸光的物质,然而cDNA又能占到多少比例?不知原理何在,
你的这个帖子内容乱的不行。。。
一般RNA质量检测之后没问题的话,我们反转录完测一下浓度,然后稀释到200ng/ul左右。取1ul作为模板,用内参基因的引物进行PCR 看条带是否正确 明亮
额,是挺乱的,可能也跟我在这块的理论知识薄弱有关,这块的基础理论背景资料哪里会有?想补一点是一点
cDNA好坏,你要什么程度的好坏?简单的RT-PCR,接着做个PCR就完事了。
我不认同在RT之后可以通过OD对cDNA定量,这如何进行?cDNA要纯化么?体系里有RNA(即便被RNaseH降解),有NTP,这些都是强烈吸光的物质,然而cDNA又能占到多少比例?不知原理何在,