最近一直用Trizol法提取线虫RNA,这个方法好像是从提植物的RNA改进的,提了几十次,要么就是什么也提不出来,要么就是降解了,请教一下这是什么方面的错误,方法上有不对的地方吗? 返回小木虫查看更多
改用试剂盒吧,会省去很多时间。
室温放置RNA晾干。。。这绝对会出问题啊,把EP管放到超净工作台里面吹一会,等到RNA快干(不能完全干,不然不好溶于DEPC水)再加DEPC水,有条件还可以加一点RNase抑制剂进去。跑胶的时候电泳相关试剂全部换新鲜的,不然很容易降解。实验中各种操作都要在冰上进行更好。 ,
一直想问为什么大家都在研究线虫?
所有的玻璃试剂瓶都要高温高压过的,EP管要用depc水泡过,液氮研磨的菌体量不宜超过100mg,氯仿离心后吸上清不要贪多,还有75%的乙醇也要depc水来配置
改用试剂盒吧,会省去很多时间。
室温放置RNA晾干。。。这绝对会出问题啊,把EP管放到超净工作台里面吹一会,等到RNA快干(不能完全干,不然不好溶于DEPC水)再加DEPC水,有条件还可以加一点RNase抑制剂进去。跑胶的时候电泳相关试剂全部换新鲜的,不然很容易降解。实验中各种操作都要在冰上进行更好。
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一直想问为什么大家都在研究线虫?
所有的玻璃试剂瓶都要高温高压过的,EP管要用depc水泡过,液氮研磨的菌体量不宜超过100mg,氯仿离心后吸上清不要贪多,还有75%的乙醇也要depc水来配置