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微米级聚苯乙烯微球在用于免疫分析时候,非特异性吸附如何降低

作者 guo_ahu
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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1. 10 微米羧基化聚苯乙烯微球,通过EDC/NHS反应包被上链酶亲和素,之后,利用链酶亲和素与生物素特异性结合,标记上了生物素化的捕获抗体。然后,用BSA封闭。
2. 设置对照组,加或不加抗原,37度水浴反应45分钟。
3. 加入包被了检测抗体的1微米的磁球。37度水浴反应45分钟。
4. 检测,两组结果没有明显差别。

怀疑是非特异性吸附,不知是否?请大家多多指教。 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • lessons1

    是不是抗体对有问题?

  • yubeihong

    是双抗体夹心法吗?

  • guo_ahu

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by yubeihong at 2017-07-29 16:22:43
    是双抗体夹心法吗?

    是的。双抗夹心法。请问您知道原因吗

  • yubeihong

    两组结果没有差别是什么结果没差别?

  • guo_ahu

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by yubeihong at 2017-07-29 20:15:24
    两组结果没有差别是什么结果没差别?

    电化学检测结果。请问您知道原因吗

  • xrr1988

    首先,如果双抗体夹心法,测抗原
    第一步磁珠-SA封闭后,加biotin-包被抗体,加抗原,再加标记物-标记抗体才能连起来一条链,
    不清楚楼主你最后的加微球-抗体是干嘛的

  • guo_ahu

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by xrr1988 at 2017-08-07 12:26:32
    首先,如果双抗体夹心法,测抗原
    第一步磁珠-SA封闭后,加biotin-包被抗体,加抗原,再加标记物-标记抗体才能连起来一条链,
    不清楚楼主你最后的加微球-抗体是干嘛的

    你好。我加的微球-抗体是作为检测信号的,微球中包了信号分子。不知道实验体系出了什么问题,就是不work

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