用毕赤酵母表达一个高等生物的糖蛋白,重复了10来次,换过几个菌株,但是一直没有检测到酶活, 上清跑电泳也没有检测到蛋白。怀疑是形成了包涵体,有人遇到过这种情况吗? 请问如何分离包涵体? 返回小木虫查看更多
如果没有检测到蛋白说明蛋白没有表达,如果是包涵体一定能检测到
上清中没有,沉淀用液氮研磨后有蛋白,但是不确定是不是包涵体蛋白,担心是酵母自身的的蛋白。 请问有什么办法分离酵母包涵体吗?
如果没有检测到蛋白说明蛋白没有表达,如果是包涵体一定能检测到
包涵体在上请中没有,只在沉淀中有,你SDS-PAGE的时候没有跑沉淀?
也有可能是没分泌出来,
另,也要从RNA水平上检测目的基因是否有转录
,
如果没有加分泌肽应该不会分泌出来
上清中没有,沉淀用液氮研磨后有蛋白,但是不确定是不是包涵体蛋白,担心是酵母自身的的蛋白。
请问有什么办法分离酵母包涵体吗?