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测化合物的乙酰胆碱酯酶抑制率

作者 碧川
来源: 小木虫 700 14 举报帖子
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乙酰胆碱酯酶用什么溶解比较好?还有显色剂DTNB、底物ATCI,文献里都查不到用啥溶剂溶解。

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  • 精华评论
  • 小卢同学

    我给你发消息,发不了,你加我扣扣吧,958756650   桃子

  • 黄老邪01

    你们解决了吗

  • 黄老邪01

    保持联系

  • 初珑111

    你们乙酰胆碱测得怎么样了啊,我测的是按高希武的方法略有修改,用dntb法测得:
        终浓度为6mmol/L的碘化硫代乙酰胆碱((98%,ATch):0.672g药品溶解在10ml蒸馏水中,得到浓度为227mmol/L的碘化硫代乙酰胆碱溶液。
       5,5'-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)显色液:12.4mg DTNB溶于100ml 无水乙醇,再加入100ml蒸馏水和50ml0.1M磷酸盐缓冲液(pH8.0)。此显色液在室温下可以保存至少6个月。
        测试方法:取待测酶液0.1mL与0.1mLATch混匀,35℃水浴保温10min后,加入3.6mLDTNB显色剂(含40%乙醇)显色并中止反应,于412nm测其光吸收值,酶活性以每毫克蛋白质每分钟分解底物的毫摩尔数来表示.即mmol·min-1·mg-1protein。

    但我不知道怎么算出酶的活性,他的文献中也没提,不知道是不是要做标曲,而且他DNTB显色液也没有告诉配制方法,这还是在他的参考文献中找到的略有修改,但是测了几次得的结果不是很好,想知道你们的方法是什么,效果怎么样,

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