如何用XAD-4树脂提取根系分泌物的相关操作
各位虫友:
大家早上好!本人小白一个,因实验要用XAD-4树脂吸附根系分泌物,然后再用甲醇洗脱出来。但是这块以前没接触过,特来寻求各位大神帮助。
问题如下:
1、新购买的XAD-4树脂要如何进行预处理?虽然在文献、百度中看到不少,但是方法各不相同,我该怎么处理?有的说用开水烫,再用乙醇、乙醚等溶剂索氏提取器中各提取24h;有的说是用无水乙醇浸泡,然后冲洗掉乙醇即可
2、如何用甲醇将树脂中的根系分泌物如何洗脱?这个地方我是一点不懂,是直接用索氏提取器,甲醇作为溶剂提取吗?那么,水浴锅的温度要如何设置
时间紧急,导师让我尽快做完这个,谢谢各位大神 返回小木虫查看更多
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先用乙醇浸泡,纯化水洗干净,再用4%的盐酸浸泡,纯化水洗干净,再用氢氧化钠浸泡,纯化水洗干净,洗脱要看你样品的吸附情况,能洗脱就用甲醇,不能就用乙醇或者丙酮,要是分离情况不好还可以用梯度!
非常感谢你的回复!已经将树脂放进去6天了,颜色有变浅,但具体吸附情况这个怎么判断?用甲醇洗脱是加入200ml 甲醇震荡还是用索氏提取器提取?请教下步具体做法,万分感谢
我百度上找了些资料,有的说装柱后,往里面加入甲醇这些试剂,要保证柱内液体体积高于树脂柱的体积,,,我这是只加入甲醇,然后等它抽完吗?之后直接旋转蒸发出甲醇就可以了吗?谢谢你
差不多是这样:树脂装进柱子,先活化,就是加乙醇和酸碱活化,然后纯水洗干净,上料液,上完之后一般还要纯水顶洗一下杂质,再用有机溶剂解析,流速1-2BV,这时候要检测流出来的单位,收集你需要的部分,去旋转蒸发。
非常感谢你的回复,对我帮助很大!不过我还有点疑问,还望不吝赐教。树脂预处理时已用无水乙醇处理,并用纯水洗净,再装柱后,还得用乙醇、酸价活化吗?还有这流速一定要控制在1~2BV吗?让它自然流完可以不?谢谢
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