C2C12细胞培养
前天解冻的C2C12细胞,经过两天了,可是分裂增殖的并不多并且好多贴壁的还是圆形的,还漂浮着好些死细胞。用的是高糖DMEM培养基和国产FBS,细胞冻存在负80℃一年多了。请问是因为冻存太久了吗?还是血清问题?加大血清比例会不会好点?
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前天解冻的C2C12细胞,经过两天了,可是分裂增殖的并不多并且好多贴壁的还是圆形的,还漂浮着好些死细胞。用的是高糖DMEM培养基和国产FBS,细胞冻存在负80℃一年多了。请问是因为冻存太久了吗?还是血清问题?加大血清比例会不会好点?
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细胞80℃太久的可能性比较大,一般负80度半年以上细胞活性就会下降,建议超过2月不用的话还是放液氮保存会比较好一点
建议换下进口的血清试下或者调高血清的比例!QQ:1114708408
1、-80是冰箱还是液氮?液氮保存1-3年我复苏都没问题,-80冰箱不太好,开开关关,温度变化大,细胞会受到影响
2、冻存前的细胞状态如何?
3、细胞密度怎么样?可以提高细胞密度,提高血清浓度,换液把漂的细胞和碎片去掉
4、排除污染问题
5、以上处理好后就放培养箱培养几天,少打动它,
谢谢大家,我提高血清比例,已经拯救过来了。