如题，我做320KD的蛋白，8%分离胶，200mA转膜3h，每次目的条带出的很好，但是GAPDH出不来，实在不知道什么原因，换过两次抗体，不过都是15年左右买的，请问各位虫友，以上情况，是抗体原因的可能性有多大？

另外，以上WB条件，40以下的marker分不开……

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