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求助!对基因片段测序结果表示不解,求大神指导

作者 米夏girl
来源: 小木虫 1850 37 举报帖子
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我对炭疽属真菌的CHS(编号D)、TUB2(编号E)、CAL(编号F)三个基因片段分别进行了PCR扩增,并送公司测序。但是对测序结果表示很不理解,问题如图中标注: http://\"对基因片段测序结果表示不解,求大神指导\" http://\"对基因片段测序结果表示不解,求大神指导-1\"
问题说明
【1】图1中,样品D3、D5、D7、D11在胶图中显示为清晰的单一条带,但测序结果全部为“正向双峰”,请问造成这种结果的原因会有哪些?胶图显示为单一条带,但是测序结果为“正向双峰”,但是反向正常,这种现象是什么原因呢?
求助!对基因片段测序结果表示不解,求大神指导
【2】图2中样品E4、E2、E6、E10、E11在胶图中显示为清晰的单一条带,但测序结果全部为“反向双峰”,但正向是正常的。请问这是什么原因呢?
样品E9、E5、E7、E8条带清晰,但是结果为“双峰无条带,无法回收”,样品F2、F5也有清晰条带,测序结果为“信号弱\无信号”,请问造成上述结果的原因是什么呢?
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  • 精华评论
  • 米夏girl

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by 小小小虫牙 at 2017-08-14 20:46:26
    有时候就会发生无论怎么搞都测不出来的结果

    这咋整……再送一遍碰运气是么

  • snoopytbw

    现在的测序公司都爱这样,唉。就是让你多测几次,多收费呗。我也遇到很多次,明显不可能没有产物的嘛,结果显示浓度过低。要么就是测序无信号。习惯就好!

  • 魔鬼的天使

    有没有可能是引物的问题?测序引物是不是不合适?或者测序引物降解之类的问题?

  • 米夏girl

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by 魔鬼的天使 at 2017-08-15 14:15:45
    有没有可能是引物的问题?测序引物是不是不合适?或者测序引物降解之类的问题?

    我是个小白,不太懂哦~会不会存在引物在PCR扩增时好用,但是用到测序中就不好用了呢?所以我的结果一组样品全是反向双峰,一组样品全是正向双峰。
    我的目的片段都是小于800bp 的,这样的情况下,我只拿到单向序列是不是就可以了呢?因为好多人说小于800bp的不需要测通。
    请大神指教~

  • 米夏girl

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-08-15 08:35:35
    现在的测序公司都爱这样,唉。就是让你多测几次,多收费呗。我也遇到很多次,明显不可能没有产物的嘛,结果显示浓度过低。要么就是测序无信号。习惯就好!

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