谁来帮我分析哈,这啥情况?
下图是我刚泡的pcr。从左往右标号1,2,3,4,5,6,7,8.其中1,2是同一个基因;3,5是相同的基因;4,是marker2000;6,8同一个基因;7
一:1,2是同一个基因,奇怪的是出现的带,要比我要目的基因(144bp)的大,这条带是300+了吧,这个情况,我应该怎么调整。
二:关于3和5,他们应该在110处,这是什么情况,还需要调整退火温度,应该往上跳是吗?还是引物有问题?
三:7,有二聚体,我是不是应该延长退火温度?或者在升高退火温度?
就我这些问题,请大家于百忙中帮忙分析下,感谢!
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三:写错了,应该是延长退火时间
自己顶,木办法
是我的问题太low,还是怎样?为啥木有人回复我???
1.2的片段大小的问题。调什么都没用,应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3,5提高退货温度试试,可以将现在的pcr产物稀释之后做模板,用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮,七有引物二聚体正常,主条带对就行了。
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