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求助,普通PCR结果无法重复

作者 吐司布丁
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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图片2是第一次做出来的结果,条带可以自动检测出来,就是不太亮,有拖带。

后来,无论怎么做都是差不多的图片1这种情况,阴性空白都会出现最上方很亮的东西,最下方引物也不清晰,甚至有时没有最下方引物条带。
所有试剂都已经换过一遍,引物也有重新设计过,PCR程序一直都是一样的。请问,该如何解决?

求助,普通PCR结果无法重复
图片2.png


求助,普通PCR结果无法重复-1
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  • 精华评论
  • Berza

    DNA纯度怎么样?没放很久吧?引物有做特异性实验吗?

  • 苏哲然

    看我以前发的帖子,我也出现这种污染

  • 吐司布丁

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by Berza at 2017-10-17 17:02:24
    DNA纯度怎么样?没放很久吧?引物有做特异性实验吗?

    测过Nanodrop,做出来的那个纯度反倒没有没做出来的好。A260/A280是1.90,A260/A230是2.06。提取和纯化用的都是QIAGEN的试剂盒

  • 吐司布丁

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 苏哲然 at 2017-10-17 17:09:40
    看我以前发的帖子,我也出现这种污染

    那请问有解决么,其实我主要问题还是根本找不到无法重复实验的原因,所以现在根本无法继续进行后续实验

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