植物代谢组学样品前处理
本人想做植物次生代谢产物方面的代谢组学研究,主要是关注的是植物的黄酮类成分。对样品的前处理方式如下,哪里有不足望各位指点:
样品处理方法:
取新鲜样品液氮冷冻后迅速研磨成粉末,然后进行冷冻干燥
配置70%的甲纯作为提取溶剂,提取溶剂中加入一定量的芦丁作为内标物质
精密称取冻干样品10mg,加入提取溶剂4ml,室温超声提取30min(100HKZ)
13000rpm离心取上清液,过0.22μm的滤膜,然后进液相检测,将样品液稀释至合适的浓度范围
将每个样品取500μL加入1.5ml离心管中,室温下氮气吹干
样品用500μL的70%甲醇复溶,离心后取上清,上机检测。
注意:
1:先用不含芦丁的70%甲纯溶液按方法提取后进液相,看峰高大概是多少,然后计算稀释的倍数,确保样品中最高峰高不超过200
2:将稀释好的样品及芦丁液进液质检测,看样品中是否芦丁。
3:芦丁进液相看出峰时间及峰高,将其稀释至峰高约20至30左右
4:每组样品约8~10个重复 返回小木虫查看更多
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没什么问题
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