过柱子除了选择溶剂梯度，还非常需要注意溶解性。溶剂系统溶解性不好，就会很麻烦。

引用回帖:

8楼: Originally posted by 15637385993 at 2017-10-20 21:06:30
这样的话，柱子会不会过的很慢，而且会交叉的厉害
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你这没办法，只能把自己需要的点过出来，其他不要的可以舍弃，然后没有分开的点再次拌样过柱，过柱前先选好洗脱剂比例，然后再过柱子，如果是和以前现象不一样，可能是东西坏了或者你加错东西导致的，仔细想想先，不过无论如何首先先把东西过出来一点，然后确定一下是否是和以前一样，不一样就要找原因了
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1）首先，是否在做柱层析之前准确尝试过样品的溶解性，这是顺利进行柱层析纯化的关键。
2）从上传的图片上分析，应该是有很大一部分物质从洗脱剂中析出来了，说明洗脱剂对样品的溶解力有限，继续如此柱层析会导致样品分离纯化时间无限延长，或者伴随杂质一起洗脱出来。
3）只能是将样品用强极性溶剂（能溶解的溶剂）从柱子中全部溶解下来，回收后再想办法纯化。

色素极性大，很正常