合成短肽革的浓度测定,初来乍到,希望大家指教
我新合成了大量的短肽大约13-20个氨基酸,合成回来后准备按照说明进行计算并溶解,但是我的导师要求我对溶解后的多肽进行浓度测定后再使用,也就是不能盲目相信公司,但是我用了BCA进行测定,发现相同浓度下的多肽用BCA测出来差别太大,有点怀疑是BCA这方法不合适,但是也不知道其他相对简单但准确的方法,初来乍到,希望大家指教
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我新合成了大量的短肽大约13-20个氨基酸,合成回来后准备按照说明进行计算并溶解,但是我的导师要求我对溶解后的多肽进行浓度测定后再使用,也就是不能盲目相信公司,但是我用了BCA进行测定,发现相同浓度下的多肽用BCA测出来差别太大,有点怀疑是BCA这方法不合适,但是也不知道其他相对简单但准确的方法,初来乍到,希望大家指教
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求大神指点
通常合成后的多肽是带盐和水的,所以你需要做一个净肽含量测定,可以采用氮元素分析,最后根据净肽量进行计算溶解,相对会更准一点,至于你说的BCA是什么方法,没有用过,所以不好评论
也不是不能相信公司,假设你多肽2000分子量,你2mg多肽理论上就1微摩尔。但是多肽他有个肽含量,去除水分盐分等,正常情况下60%-70% 。所以需要重新测定
首先要明白浓度不等于纯度,多肽纯度只是指目标多肽相当于其他杂肽的百分比含量,这里面是不包含水分以及其他盐类的
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