新手第一次做QPCR，有些问题想问大家
我用相同浓度的cDNA样品，为什么各个样品的β-actin以及18S内参起跳值都不一样，最大的相差十几个循环。求大神解答！！！！！用的是罗氏96仪器，trans试剂盒。
qqq.png@biostar2009@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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很可能与加样的准确性有关。
每个样品有3个重复吗？
每个样都设了一个副孔
我加样的体积是5微升，而且大批加重复的样都会每隔几个换一次枪头，应该没有什么相差把
这是cq值柱状图
123.png
相同浓度的cDNA不等于相同纯度的cDNA。多设置几个副孔试试，排除加样误差。
cDNA的A260/A280 都是1.85或1.86 A260/230都大于2.0且相差不大
，