western杂不出带，胶上有蛋白
最近做western光系统的核心蛋白，提了类囊体膜蛋白，跑SDS胶上有蛋白条带，半干转膜，抗体孵育（phtoAB的抗体），DAB染不出色，杂不出！大家帮忙分析下原因
我想着（1）DAB显色不敏感，换用ECL化学发光法？（2）转后的膜没用PBST漂洗SDS，影响一抗与蛋白结合？（3）一抗二抗结合差，这条可能性不大，抗体都一个牌子的一块买的。（4）吐温干扰一抗二抗结合？
感谢大家！帮忙想想，文章修改日期马上到了，意见一条就是补western试验 哎！
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膜.jpg
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京公网安备 11010802022153号
送公司做，1000一块胶
提取的蛋白浓度低，转膜的电压时间也很重要，需要摸索，可以查查文献看看
，
可能抗体不行哦，告诉蛋白名称的话可以帮你看看别人sci中的实验条件与常用抗体
说实话你的转膜太差，marker应该要非常清晰才行。
转膜还需要调整