小木虫

咨询各位：本人要自己制备NGS文库，需要去除游离adaptor以及adaptor自聚体呢？之前用了yeasen纯化磁珠的，感觉回收效率差，而且纯化效果也不佳。beckman的AMPure有点小贵，各位大神有没有用过的经济实用的万分感谢

首先我的目的片段2.3kb左右、T载2kb左右、目的载体12kb左右，好不容易连接上了T载，然后测序正确。就开始从T载上面酶切目的片段（条带一小点不容易分开），应该影响不大，毕竟T载和目的载体抗性不同，之后酶切目的载体。用T4连接酶连接目的载体和目的片段，单克...

我自己设计了两条完全互补的DNA单链，用纯水稀释，95℃热激5min，室温退火，通过凝胶电泳验证，发现只能形成很少的双链。但是用同样的操作处理文献中的两条单链DNA，是能够成功合成大量的双链的。有没有大佬知道这是什么问题？自己在网上尝试了几种退火缓冲，也更改过...

一般鉴定基因型在1个多月，出生7天的小鼠可以鉴定吗？有人试过吗？鉴定时剪那个部分的组织？

看文献，作者研究一个蛋白对病毒滴度的影响，选择将基因插入到乳糖操纵子模型中，通过IPTG选择性的表达，他为什么不把这段基因直接敲除呢？

想问一下大家有没有用3dmax画过蛋白质分子，什么类型的蛋白质分子都可以。能交流一下吗，不太容易画，有画过的能分享一下最好了，私聊～（大家帮忙留言顶一下）

最近做农杆菌转化曲霉菌，真菌和农杆菌共培养后，逐渐在表层长出粘粘的菌（类似大肠杆菌）。好几次转化都这样，怀疑是农杆菌染菌了，或者抗生素失效了，大家有类似的情况吗？做了几次都这样，耽误了两个月时间……

发现了有趣的现象在构建质粒过程中，在目的基因前加信号肽导致会目的基因序列缺失或大肠杆菌致死，大家有没有遇到这样的情况？或者大概分析一下可能是哪些原因呢？

2009化学工业出版社出版，跪谢！

求推荐能做烟草转化实验的生物公司，近期想做抗体特异性检测，需要瞬转烟草，然后提取目的蛋白出来做WB。非常感谢！

求助哪位大佬会做分子对接呀，蛋白与蛋白，蛋白与化学物质之间的。需要用什么软件，pymol这个软件可以做吗？

提取的总RNA测A260/2802.0,跑胶可以看到28S明显比18S亮很多，但是把胶割下来以后用试剂盒回收，18S的浓度比28S大是什么原因？

体内药效学测定证明了人胰腺和nsclc肿瘤异种移植物中krasg12c信号传导的剂量和时间依赖性抑制。通过质谱法测量amg510对krasg12c的共价修饰，并与肿瘤中的p-erk抑制相关。amg510显著抑制krasp.g12c异种移植物的生长并导致肿瘤消退...

目前想将我的目的基因插入到带有嘌呤霉素的质粒上，做吉布森Gibsonassembly组装的方法连了一个月了，没有连接成功如:目的基因是MT，嘌呤霉素基因是pac，质粒为PA设计同源臂引物：MT-up-F\\R；MT-Pac-F\\R;MT-dn-F/R;PA-...

实验室准备购买一台荧光定量PCR仪，主要检测mRNA相对表达水平这块，之前用过ABI7500，不过机子太老了，现在买可能不太好。目前看了ABIQ3Q5和Biorad的类似的一款（报价二十多万的样子），有没有用过的园友分享一下使用情况，有没有推荐的，谢谢

文献求助，请大神帮忙！Engineeredantibodyfragmentsandtheriseofsingledomains'https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16151406'

一段目的基因的来源是一株野生型的酵母，那请问表达这个蛋白，宿主选择是酵母好还是大肠好，哪个能表达的酶活性更高呢？以及酵母的耐受有机溶剂能力是不是比大肠要强一些？

一直做组蛋白酶敲除，这是看家基因比较难敲除。好不容易通过同源重组的方法筛到正确的转化子。现在，发现再转挑纯化就又变成野生型了，但是表观形态和野生型却不一样。各位大佬路过烦请解答一下，谢谢！

各位大神，小弟最近接触蛋白质小分子相互作用分析，想请教一下用什么方法可以测定蛋白质和小分子如何共价结合？

一直做组蛋白酶敲除，这是看家基因比较难敲除。好不容易通过同源重组的方法筛到正确的转化子。现在，发现再转挑纯化就又变成野生型了，但是表观形态和野生型却不一样。各位大佬路过烦请解答一下，谢谢！

真菌孢子是单倍体还是多倍体？

求293T细胞可换其他细胞杭州的最最好其他城市也可以

请问各位大神，SDS-PAGE胶在4度冰箱放置后有出现缩胶的情况吗？就是梳齿两旁、靠近胶两侧的地方缩胶。有的板缩了，有的没缩。为什么会这样啊？怎么避免这种情况发生？

有没有大佬有IEC-6或HIEC-6的，求一瓶，有偿。

做定点突变大家推荐哪个公司的高保真酶和DpnI酶，质粒大概6Kbp

WB跑出来两条相差10KD的完整条带，是抗体特异性差的问题吗

最近在扩启动子。普通方法怎么都扩不出，想请教下大家怎么用overlapPcR设计引物去扩启动子。麻烦惹