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bbpiger

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 梯度洗脱问题?

求助各位大神:

   做液相遇到以下问题:

  岛津SPC-20A HPLC仪器,流动相:色谱纯甲醇、pH=3的乙酸水溶液,波长254nm,C18色谱柱,含三个物质的混标:

1、如何改善出峰时间长+宽峰这些缺点?

为何采用以下梯度洗脱:0-9min 70% 有机相;9-15min,70-90%有机相;15-25min,90-70%有机相,会出现15min后基线非常不平,但是在9-15min期间明

明也改变了流动相比例可是基线确实相对平的,为什么15min后会出现这样的情况呢?如何改善?
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shuniao

木虫 (正式写手)

2楼2018-03-31 12:32:08
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bbpiger

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuniao at 2018-03-31 12:32:08
流动相超声脱气了吗?

超声脱气了的。但是梯度洗脱这个问题还是没有解决
3楼2018-03-31 14:40:32
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繁夏

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主

4楼2018-03-31 15:29:09
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王其超

新虫 (小有名气)

15分钟后的梯度下降导致的

发自小木虫Android客户端
5楼2018-04-02 23:56:08
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谁知道呢?

铁虫 (小有名气)

70-90%时间只有6分钟,有延迟体积,还有乙酸水有吸收导致基线不平。

发自小木虫Android客户端
6楼2024-04-06 16:55:44
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宝藏实验室

新虫 (正式写手)

把有机相高比例的梯度放缓一些,有助于改善。但是没办法根除,原理详见紫外检测器原理
液相色谱柱修复技术人员,可以修复各种凝胶柱、UPLC柱、C18、C4、HILIC柱等。
7楼2024-04-23 13:40:57
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