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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 分析前沿 » 纳米材料和抗体结合,抗体溶液中能否含有大量牛白蛋白（BSA）
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SHE0.0592

木虫 (小有名气)

Nanobiosensors

[求助] 纳米材料和抗体结合,抗体溶液中能否含有大量牛白蛋白（BSA）

最近本人正在研究纳米免疫传感器的方向，看文献中，纳米材料与抗体结合，所用的抗体溶液都是纯抗体，纳米材料和抗体结合之后，采用2%左右的牛白蛋白（BSA）溶液封闭纳米材料上剩余的活性位点。
    但是，很多国内的生物试剂公司的抗体中都含有一定量的BSA（1%左右），
   我想问这样的抗体是否可以用来结合纳米材料，从而达到信号放大的目的。
    或者说抗体和BSA固定到纳米材料上，那个更容易先接到纳米材料上。
    本人觉得这样是不可以的，因为按理说抗体和BSA都是蛋白，固定到纳米材料上的几率是一样的，但买纯的抗体粉末是非常贵的，国内的这些生物试剂的抗体产品很多都是国外分装的，他们配成溶液来卖，确实要含有一定量的BSA，才可是抗体稳定。
    但是国内很一些做这方面的小组也是用这些含有BSA的抗体来做研究的，所以我想看看大家的想法。这种做法是否可以。
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haveagoodone
1楼2012-02-22 19:36:41
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

YizhenLiu

木虫 (正式写手)

主管区长

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
SHE0.0592(金币+8): ★★★很有帮助 2012-02-29 10:41:00
LS说的有道理，虽然BSA不含糖基非特异性吸附小，但BSA最大的问题是其含有自由巯基，所以和单纯抗体的连接方式不太一样，可想而知BSA连接上去后抗体就比较难上去了
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4楼2012-02-25 14:41:37
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aquemarine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
SHE0.0592(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-22 22:09:55
从pI的角度来讲，BSA的pI为4.6左右，抗体的pI大致在5.5-8.3之间，这样看来，在生理缓冲液的条件下，一般纳米材料还是优先与IgG类抗体先作用的。不过你使用时，抗体溶液（含BSA）的浓度可能得酌情加大，然后同样用BSA溶液封闭剩余的纳米材料上的位点。
从结构的角度，IgG含一定量的糖，而BSA不含糖，抗体还是优先结合到亲水性强的纳米材料表面。
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SHE0.0592
守候健康 等待平安归来！
2楼2012-02-22 21:21:55
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suela

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西湖醉鱼(金币+1): 欢迎新人 2012-02-26 19:59:28
SHE0.0592(金币+5): ★有帮助 2012-02-29 10:41:12
SHE0.0592: 金币+5 2012-06-05 19:21:37
要看你是用什么方法将抗体连上去了 如果你用的方法就是普通的利用 氨基或者羧基的方法，那么BSA肯定优先抗体连上去了， 因为封闭的BSA浓度很高（1%差不多是10mg/mL) 而一般抗体的浓度是没有那么高的。最好是买纯化的不加BSA的抗体。这样的抗体也是很多的。
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5楼2012-02-26 19:49:18
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marongtx228

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
SHE0.0592: 金币+1 2012-06-01 16:26:35
SHE0.0592: 金币+1 2012-06-04 12:18:02
白蛋白在生物交联剂的作用下，蛋白的氨基和抗体的羧基才会交联，一般不加任何成分的情况下属于物理结合，通过范德华建结合，它是不牢固的。
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6楼2012-06-01 16:00:59
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)
如果只是看纳米材料与抗体的结合，不要买针对较特殊抗原的抗体，买那种抗XXX IgG的抗体，这种抗体没那么高档，有不少商品化抗体的浓度与BSA相当或更高，也更容易买到纯化的抗体粉末，还不那么贵。
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SHE0.0592
8楼2012-10-10 14:31:50
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by SHE0.0592 at 2012-10-10 16:12:05
谢谢你的回复。对于这方面的问题，我现在已经比较了解了。看来你也是行家呀。。。。
上面有我QQ号（501711465），我们很期待我们可以进一步交流的。...

呵呵，我的QQ一般不常开，倒是经常上小木虫挣金币，可以给我发消息的。

早先做抗体的固定化用于检测特定的抗原，效果总是不好，拿各种效果好和不好的抗体跑电泳才注意到问题所在。觉得奇怪别人涉及这方面的为什么说做得怎么怎么好，仔细一看都是用某个种属的IgG做模式抗原
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10楼2012-10-10 20:35:23
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by SHE0.0592 at 2012-10-11 10:03:04
好！其实也就是开发个方法，模型都一样的，我现在就喜欢用高特异性的便宜的抗体。，但是文章的档次就低了些。...

如果是不想都用抗XXX IgG，可以看看有没有哪些课题组是专门做抗体的愿意提供帮助或合作。也有其他办法，省事又省钱的话，还可以试一下博士德的小鼠抗P53单克隆抗体。
现在不知道怎么样，但是好些年（6-9年）以前用这种抗体做固定化效果还是很不错的。那时候专门测过一些不同抗体试剂中抗体纯度，这种抗体试剂的抗体浓度蛮高的，有BSA、但是浓度不高，用于固定化做检测的效果还不错。他们其他的小鼠抗XX单克隆抗体只试过两三种，不推荐直接用于固定化。
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SHE0.0592
12楼2012-10-12 10:26:59
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普通回帖

SHE0.0592

木虫 (小有名气)

Nanobiosensors
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by aquemarine at 2012-02-22 21:21:55:
从pI的角度来讲，BSA的pI为4.6左右，抗体的pI大致在5.5-8.3之间，这样看来，在生理缓冲液的条件下，一般纳米材料还是优先与IgG类抗体先作用的。不过你使用时，抗体溶液（含BSA）的浓度可能得酌情加大，然后同样用 ...

从PI考虑，只是考虑到利用正负电荷的作用使纳米材料和抗体结合，然而在抗体与纳米材料结合中，比如纳米金和抗体，抗体和BSA中的S=S键与金纳米形成金硫键应该更强才是，还有疏水键。
能否加QQ继续交流
我的QQ：501711465
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haveagoodone
3楼2012-02-22 22:09:44
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SHE0.0592

木虫 (小有名气)

Nanobiosensors
引用回帖:
6楼: Originally posted by marongtx228 at 2012-06-01 16:00:59
白蛋白在生物交联剂的作用下，蛋白的氨基和抗体的羧基才会交联，一般不加任何成分的情况下属于物理结合，通过范德华建结合，它是不牢固的。

我问的是纳米材料，和蛋白的结合，你理解错了吧
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haveagoodone
7楼2012-06-01 16:26:26
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SHE0.0592

木虫 (小有名气)

Nanobiosensors
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by dodogougou at 2012-10-10 14:31:50
如果只是看纳米材料与抗体的结合，不要买针对较特殊抗原的抗体，买那种抗XXX IgG的抗体，这种抗体没那么高档，有不少商品化抗体的浓度与BSA相当或更高，也更容易买到纯化的抗体粉末，还不那么贵。

谢谢你的回复。对于这方面的问题，我现在已经比较了解了。看来你也是行家呀。。。。
上面有我QQ号（501711465），我们很期待我们可以进一步交流的。
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haveagoodone
9楼2012-10-10 16:12:05
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