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凉宫春日团长

新虫 (初入文坛)

[求助] qPCR溶解曲线能否反应高度相似的基因引物特异性

我有两个基因,序列高度相似,两个引物方面都只有3端有单个碱基的差异,并且扩出来的片段基本一致,重复一遍,只有两个引物3端有单个碱基差异,这种情况下,溶解曲线单一能否反应引物特异呢?

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打工人小欢

铁虫 (初入文坛)

熔解曲线与TM值有关,单个碱基差异时可以在突变位点设计荧光探针,最后熔解曲线看探针的荧光情况。

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2楼2023-06-08 15:12:34
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hyjtb

铁虫 (小有名气)

要看機器的精準度,主要還是看引物的Tm值是不是一樣。溶解曲綫是反應Tm值。
3楼2024-04-24 21:50:49
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