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董滋强铁虫 (小有名气)
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大肠杆菌高密度发酵培养表达已有1人参与
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| 在5L的发酵罐中培养，2阶段发酵，发酵罐中的OD始终涨不上去，OD600在30左右，看文献中，相同的配方，同样的条件，OD600能长到100多，想请问为什么？也连续补料了，补的是葡萄糖，使发酵罐中始终维持在20g/L的葡萄糖浓度，OD30的时候，发酵罐很黄，不知道这是正常生长的吗 |
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2楼2023-12-21 12:51:17
3楼2024-02-22 17:09:53
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小冀-: 金币-5, 屏蔽内容, 违规存档, 本版块禁止发送任何广告推广信息 2024-02-26 09:00:44
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4楼2024-02-25 20:00:32
【答案】应助回帖
| 1）不用先纠结残糖浓度，先保证溶氧和pH在你设定的范围内，葡萄糖作为C源的话发酵一般产酸，会一直补碱，你可以做一个OD600/补碱的线性拟合，一般R2会在0.95以上；2）如果pH和溶氧没问题，就考虑葡萄糖是不是过量了，OD到30应该在补料阶段了，可以停止补料试探菌种状态，1分钟内溶氧没有显著上升就是补料过量了，产乙酸会很厉害，菌株状态会很差；3）离心收集菌体的时候看看上层有没有很粘稠的，鼻涕一样的胶装体，那是自溶死了的大肠杆菌，如果有你得考虑一下染菌或者是不是发酵条件不合适，菌体大量自溶了；4）看看你宿主菌的基因型，有没有哪种微量元素或者化合物缺陷，如果有要额外补。 |
5楼2024-04-09 08:49:14
40