我在PCR过程中遇到很奇葩的现象，阴性对照组（模板为水），会P出来阳性条带，而且与目的带（目的带在186bp左右）大小在同一位置。
1，尝试了更换不同的退火温度（58/62/65），假阳性带依然存在。。。。,
2，曾经以为假阳性带会是交叉引物二聚体类产物，尝试了PCR体系中添加5%DMSO以及将引物100℃煮沸再用，结果还是存在假阳性。。
3，试着换掉了TAQ酶及DNTP还有水，依然是徒劳。。。

下图的左一模板为水，后面依次为不同浓度的阳性模板。。PCR的退火温度为58℃，循环数目35.

我想请教下各位大神，还有什么好的办法来找到PCR污染或者假阳性带的原因，或者是不是因为目的带偏小，所以才会遇到这种问题呢，尝试了各种办法，最近真是被愁死了，要P疯了。。。


20170516  HHV8 35 cycle.JPG 返回小木虫查看更多