sod,pod测定是遇到的问题
在测定sod的过程中,由于第一批用试剂盒测定的数据不好,只能重新测了,其中2个梯度的材料总共只剩下0.2g叶片材料保存于-80,其他3批材料还有还有0.6g,所以只能按比例减少用量来测定,一共还要测定sod,pod,cat,可溶性糖,Pro,叶绿素含量,mda,任务多,材料少,现在正在探索用0.05g材料去实验,有没有大神懂用的材料少可不可以测定出结果来。
现在的主要问题是我的磷酸缓冲液是0.05mol,ph=7.8的,研磨完液体就会变成红棕色,这样的酶液还能不能用是不是已经失活了还能不能测定?而且很快就会变色,会不会是因为室温太高了造成的?现在由于材料有限,只能讲上清液稀释才够用,稀释之后影响测定结果吗,还是直接用0.05g材料加入5ml缓冲液测定呢?还有就是在4000lx的光下反应8分钟时A0=0 8,按照实验说明就应该停止反应了,可是其他测定管还没有变色,看不出有没有大道50%的抑制率,不明白50%抑制率是一个什么标准。求大神指点,问题有点多
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测定时酶液只加了一半,数据还可以用吗
没有混匀,加入双氧水后晃几下
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书上写是去除酚类物质的影响,可能也是抗氧化物质吧。