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xiyingliai

新虫 (著名写手)


[交流] 化学蛋白组学样品前处理中的疑问

求教蛋白组学大佬:蛋白样品biotin化之后连接streptavidin磁珠,然后进行on bead digestion前加入6m urea和10mm  dtt并65℃加热20min使蛋白变性,这一操作会不会破坏biotin和streptavidin之间的连接?
如果先将biotin化的蛋白消化再连streptavidin磁珠,连磁珠前是否需要加热灭活前一步的typsin防止其破坏streptavidin(因为它本质是个蛋白)?

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冰鉴照心

新虫 (初入文坛)



xiyingliai(金币+2): 谢谢参与
直接用NHS磁珠通过化学键连接蛋白样品,比链霉亲和素磁珠要方便、牢靠。
28楼2023-02-10 14:46:45
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