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xiyingliai

新虫 (著名写手)


[交流] 化学蛋白组学样品前处理中的疑问

求教蛋白组学大佬:蛋白样品biotin化之后连接streptavidin磁珠,然后进行on bead digestion前加入6m urea和10mm  dtt并65℃加热20min使蛋白变性,这一操作会不会破坏biotin和streptavidin之间的连接?
如果先将biotin化的蛋白消化再连streptavidin磁珠,连磁珠前是否需要加热灭活前一步的typsin防止其破坏streptavidin(因为它本质是个蛋白)?

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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



xiyingliai(金币+2): 谢谢参与
会破坏SA,我们用purimag的链亲和素磁珠,65度链亲和素已开始轻微解聚。建议还是消解后连bead

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25楼2023-02-09 13:17:22
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chenhuanlong

新虫 (文学泰斗)



xiyingliai(金币+2): 谢谢参与
3楼2022-12-30 16:07:01
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zszly2楼
2022-12-29 21:28   回复  
xiyingliai(金币+2): 谢谢参与
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