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七七七原

新虫 (小有名气)

[求助] 有没有会做链霉菌接合转移的前辈们请进

最近在做链霉菌的接合转移,已经做到覆药步骤了,用萘啶酮酸和安普覆药之后只能见到几个小小的菌落,也不知道是不是链霉菌,挑了这些单菌落到平板上纯化的时候长出来的好像都是大肠杆菌,请问这样该怎么办,前面的步骤需要进行什么调整吗

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七七七原

新虫 (小有名气)

再补充一下,覆药之后会整个平板都长白白的一层,好像是大肠杆菌,挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去,这样该怎么办

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2楼2024-03-17 18:11:09
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gpm123456

新虫 (初入文坛)

我做过这个实验,可以给你分析一下,你具体是什么链霉菌?载体用的是pSET152??
3楼2024-03-20 11:28:26
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七七七原

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gpm123456 at 2024-03-20 11:28:26
我做过这个实验,可以给你分析一下,你具体是什么链霉菌?载体用的是pSET152??

谢谢!质粒是pib139

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4楼2024-03-20 15:39:22
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七七七原

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gpm123456 at 2024-03-20 11:28:26
我做过这个实验,可以给你分析一下,你具体是什么链霉菌?载体用的是pSET152??

质粒是pib139,很多文献也用这个做出来了,是白色链霉菌

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5楼2024-03-20 15:40:24
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linzuduan

铁虫 (小有名气)

链霉菌的菌落形态环视非常明显的,前期是跟细菌有点像。
微生物发酵工程、生物合成
6楼2024-04-08 09:28:13
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quanchong

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 七七七原 at 2024-03-17 18:11:09
再补充一下,覆药之后会整个平板都长白白的一层,好像是大肠杆菌,挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去,这样该怎么办

如果萘啶酮酸应用合适,理论上不会再生长大肠,怀疑是杂菌污染,我也碰到过,控制好无菌操作再做一次;接合子数量少的话可以增加下大肠供体菌和孢子用量,有的人会探究两者比例已达到最佳接合效率。我的经验是模式链霉菌都很好做接合转移。
7楼2024-04-12 19:08:38
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gpm123456

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 七七七原 at 2024-03-17 18:11:09
再补充一下,覆药之后会整个平板都长白白的一层,好像是大肠杆菌,挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去,这样该怎么办

具体步骤我看一下,给你找找原因
8楼2024-05-06 13:51:53
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