小木虫

最近在做DNA链置换方面的实验，反应在PBS中进行，其中链A、T、B的浓度试了两组，10nM、1nM、5nM一组，50nM、1nM、25nM一组。链A和链T结合，链B可以与链A结合从而将链T置换下来，从而链T能够继续参与反应，实现链T量的放大。但是实验结果发现...

求定点突变单个碱基的质粒构建的原理！如果采用一步法进行定点突变，设计引物时将突变碱基设计在中间，这样的话PCR为什么会得到有交错缺口的突变质粒？求在该种情况下PCR变性退火延伸时的图！

求助各位大佬，本人在做分子信标识别（MB）和信号放大方面的工作，T是靶标核酸链，B是理论上能将与MB结合的T替换下来，游离的T再次与MB反应，以实现T的量放大的效果。具体步骤如下：1、MB探针溶于缓冲溶液（10mMTris-HCl，2mMEDTA，5mMMgC...

请问下，那种多重序列比对结果，输出时候，相同序列显示星号的结果，DNAMAN软件能做到吗

请问各位，现在天冷，复苏好的细胞需要20℃恒温物流，可是我并不知道可以送恒温物流的企业，请各位有经验的帮帮忙。谢谢大家。

我从叶片中克隆了我要的目的基因的启动子，送测结果和基因组的结果有一段11bp的缺失，想问问各位大佬，我所克隆的这个启动子能继续下一步构载体吗？元件预测几乎一致

更改酶切位点进行PCR，然后将PCR产物与载体骨架进行连接，获得改变了酶切位点的载体：有两个问题：以XbaI为例，酶切位点在CTCGAG的C和T之间，更改酶切点的的时候，是只在引物一段加上“TCGAG”还是要加上“CTCGAG”，即要不要加酶切位点之前的碱基C...

crispr相关的一篇文献，外行实在是看得不是很懂，有偿求助啊！

学生有一个疑问，基因过长的话可以分段合成，分段的基因如何连接在一起，如果设计引物的时候加了酶切位点，用连接酶的话，基因中岂不是多了几对酶切位点的碱基序列吗

【上海技术交易所招聘】上海技术交易所成立于1993年，是由国家科技部和上海市人民政府共同组建的我国首家国家级常设技术市场，国家级技术转移示范机构。【招聘】成果转化项目实习生、应届生、富有工作经验的人士工作内容：1、记录科技成果产业化状况，对科技成果形成技术先进...

请问CRISPR双质粒系统，两部转化，一次是转入含Cas9蛋白的质粒，一次是转入含target的质粒，这两部转化都需要电转化吗？请问这两部转化用电转和化转有什么区别呢？谢谢！

各位请问两种质粒共同转化表达菌株BL21（DE3）为什么诱导不出带来呢？复制子不一样，抗性不一样，菌液pcr都有带，用的PH8.0TrisHCl裂解菌体，BL21condon稀有密码子对照菌株同样结果，一个蛋白诱导出来了，想要的目的蛋白没有诱导出来，实在想不通...

各位虫友，请问Infusion克隆与gibson克隆有什么区别？

RT，具体情况就是DNA是订制的，但是标记的荧光染料使我们自己合成的，可以修饰羧基，氨基，羟基这种集团，想问一下，一般DNA怎么标记这种荧光染料，对DNA和染料各自有什么要求，标记完成之后，又该怎么提取DNA用于接下来的实验呢，我需要液相就可以，浓度啥的怎么确...

RT-qPCR实验组与对照组之前如何进行差异性分析，

某篇文章中，同一张膜的两个蛋白使用了同一个内参，但是把两个蛋白分（同张膜）成了两张图说明问题，下面都跟着内参（同张膜上的同条内参），这样算不算学术不端啊？有点害怕举个例子差不多像这样↓---a蛋白---b蛋白---x内参→---x内参（两条x内参用了同一张图片...

酵母双杂验证的时候AD-BD二缺长的很好但是四缺长了很多，但是一直长不大是怎么回事，一直都是一毫米直径那种大小，是什么原因呢

请问一下空间转录组测序公司有哪些呢？并且大概价格是多少呢？

构建好测序没有问题的质粒在做了一段时间的实验后，重新转化，为什么菌P结果会一直出现其他条带？一条是目标大小的条带，一条是空载大小的条带，在两者之间还有一条很弱的条带。

第一部分细胞流式检测简介1.细胞流式检测就是对在高速流动的鞘液包裹下的细胞、粒子进行分析和分选的技术，这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个细胞，且可进行多参数测量，另一特点是在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出...

同源重组双交换法获得敲除突变株，传代纯化太多次会不会影响后期发酵?

新人求问，如果知道一段已知基因启动子前面的一小段DNA片段，请问如何用实验的方法去验证它是否有可能是编码miRNA的基因呢？

构建载体需要扩增出PBI121中的NPTII基因，我用了1300和水分别作为阴性对照和空白对照，但是见鬼加邪门的是，为什么，阴性对照和空白对照也能扩增出一毛一样的条带啊，而且测序都还是对的（跟PBI121中的序列完全一致），我真的是整个人都不好了，我是不管不顾...

突然想到一个问题，请教广大高人。女性有两条X染色体，其中一条会通过甲基化等方式随机失活，只保留一条染色体有活性。有一些X染色体连锁的隐性致病基因，比如甲型血友病F8。女性有可能是携带者，不表现为血友玻那么问题来了，如果携带正常F8基因的染色体失活，女性个体是否...

突然想到一个问题，请教广大高人。女性有两条X染色体，其中一条会通过甲基化等方式随机失活，只保留一条染色体有活性。有一些X染色体连锁的隐性致病基因，比如甲型血友病F8。女性有可能是携带者，不表现为血友玻那么问题来了，如果携带正常F8基因的染色体失活，女性个体是否...

原核表达载体，融合蛋白，必须要有ATG吗，标签在N端，不加问题应该也不大，加了也没什么问题

连接t载后的序列，测序结果回来后怎么比对呀。因为pcr时是保真酶还做了加a反应

1、本人合成了一段5\'荧光基团，3\'端淬灭基团标记的DNA链，还有一条与它互补的常规的DNA链；2、单独检测荧光基团和淬灭基团标记的单链DNA的荧光值为个位数（大概5左右），经过退火程序和常规DNA链退火成双链后，检测荧光数值为70左右;请问大家有没有遇到...

ABA-insensitivemutant