24小时热门版块排行榜    

查看: 2965  |  回复: 23
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 1974707632 的 9 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1974707632

新虫 (小有名气)


[交流] 磁珠偶联DNA、蛋白、抗体的探讨

分析研究中,我们常常需要用到磁珠偶联小分子、DNA/RNA、蛋白、抗体等用于后续的分析或Pull down实验。
试验中经常会失败,后来我们总结了这一过程主要影响因素。
因为我们实验室用得最多的就是羧基磁珠偶联氨基的配体:
1、配体浓度影响很大,一般来说高浓度配体更容易偶联成功;
2、磁珠特性影响很大,特别是磁珠表面羧基密度和磁珠的悬浮特性,我们经过筛选后来主要使用PuriMag的G系列羧基磁珠最好用,其最大特点就是基团密度高、悬浮好且磁吸快,在我们的实验中甚至好于dyna的myone系列;
3、羧基磁珠的活化一般不能超过1h,我们一般采用EDC/NHS活化;
4、偶联时间和温度相关,最保险是4度过夜孵育,这样易失活的配体影响最小;
5、封闭对磁珠的非特异吸附是有较大影响的,但是有时候由于磁珠本身的表面太疏水,不大能通过封闭改变其非特异吸附。一般来说BSA封闭好于氨基乙醇等。
6、非特异吸附一般主要是对蛋白的非特异吸附,对于非蛋白相关研究,不必过分在意;但对pull down实验还是影响比较大的。
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
16楼: Originally posted by lgz2017 at 2022-05-24 23:32:00
楼主你好 用BSA封闭的话,一般是多少进行封闭呢

BSA用1mg/ml封闭

发自小木虫IOS客户端
17楼2022-09-27 00:07:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

1974707632

新虫 (小有名气)


欢迎大家有什么问题和经验一起发上来交流一下。
2楼2021-07-18 18:22:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



1974707632(金币+1): 谢谢参与
很好,受启发。PuriMag的羧基磁珠偶联适配体效果如何?

发自小木虫IOS客户端
4楼2021-07-27 15:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1974707632

新虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by yubeihong at 2021-07-27 15:26:16
很好,受启发。PuriMag的羧基磁珠偶联适配体效果如何?

PuriMag磁珠用起来还不错,算国产中比较好的了。
6楼2021-08-07 20:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
nono20097楼
2021-08-09 06:24   回复  
1974707632(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
nono20098楼
2021-08-09 06:24   回复  
1974707632(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
nono20099楼
2021-08-09 06:24   回复  
1974707632(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
tzynew3楼
2021-07-18 18:27   回复  
1974707632(金币+1): 谢谢参与
i 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy5楼
2021-07-27 15:52   回复  
1974707632(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
bjdxyxy10楼
2021-08-09 10:04   回复  
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 申请基金代表性成果 +11 lancet0903 2024-05-17 12/600 2024-05-19 09:34 by jklily
[找工作] 绍兴文理学院怎么样?有没有坑啊 +5 zhaojiang427 2024-05-16 11/550 2024-05-18 19:43 by zhaojiang427
[基金申请] 国自然青基把共同第一作者标成了唯一第一作者 +27 1137025804 2024-05-15 29/1450 2024-05-18 16:22 by CQmadfrog
[基金申请] 连续3年国社科青年本子都没中,今年最后一次青年了,写本子完全浪费时间 +11 ddkk3000 2024-05-15 16/800 2024-05-18 16:13 by kcmn1000
[基金申请] 这个模块怎么成了烧香拜佛的地方了 +5 shrz98 2024-05-18 5/250 2024-05-18 09:50 by 鱼翔浅底1
[硕博家园] 耐高温垫片求购 +6 Sexyflea 2024-05-16 9/450 2024-05-18 08:31 by nanbeiY
[基金申请] 面上评委可能变为7个了,是好是坏呢? +20 suiyuanwgz 2024-05-15 25/1250 2024-05-17 17:05 by 能丫
[基金申请] 怎么成为NSFC评审专家? +12 phamacy 2024-05-12 13/650 2024-05-17 15:40 by oooooo?o
[电化学] 锂离子电池石墨负极用 1M LiPF6 in DEC:EC=1:1 Vol% 可以吗? 50+3 fffhhhhh 2024-05-15 8/400 2024-05-17 14:57 by 多点关心多点i
[基金申请] 青基 +3 变成超人 2024-05-15 4/200 2024-05-17 12:42 by ssxclkj
[教师之家] 普通高校有编制讲师与211高校无编制专职科研岗,应该怎么选 +17 1137025804 2024-05-15 22/1100 2024-05-17 12:10 by cleverly
[教师之家] 青椒的未来在哪里? +14 sxhuabin 2024-05-15 14/700 2024-05-17 08:58 by Quakerbird
[考博] 24应届生寻博导 +3 8139173 2024-05-15 4/200 2024-05-16 21:09 by 不容易456
[基金申请] 网传南京林业大学加拿大博士首聘期不合格,自杀 +26 babu2015 2024-05-12 35/1750 2024-05-16 19:28 by danisha
[基金申请] 系统导出申报书中参与人那一页的格式,跨入两页,要通过调整行间距调整到一页吗? +3 danisha 2024-05-15 5/250 2024-05-16 18:21 by danisha
[硕博家园] 求助,请问我是否该转专业 +8 ygcbl 2024-05-12 10/500 2024-05-16 09:18 by 清晨和风一起
[有机交流] 无水硫酸钠除水 50+4 桃桃PXS 2024-05-13 4/200 2024-05-14 17:46 by 小肉干
[硕博家园] 哈工大硕博招生! +4 nailooo 2024-05-12 5/250 2024-05-13 22:04 by yuanjijoy
[考博] 韩国成均馆大学 软物质杂化材料研究室 Koo Chong Min 教授课题组 诚招博士生 +5 NWPUGZG 2024-05-13 9/450 2024-05-13 16:40 by NWPUGZG
[论文投稿] Journal of Electrical Engineering&Technology Reviews Completed 快一周了 10+4 qweasd12345 2024-05-12 5/250 2024-05-13 10:00 by bear2007
信息提示
请填处理意见